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CAS号：121714-22-5
分子式：C51H50Cl2N2O23
分子量：1129.85
纯度：≥95.0%
保存：-20℃

产品性质：
1.外观：红色粉末
2.纯度：≥90%(HPLC)
3.产品描述：Fluo-3,AM是最常用的检测细胞内钙离子浓度的荧光探针之一。它穿透细
胞膜进入细胞后被细胞内的酯酶剪切形成Fluo-3，从而被滞留在细胞内，Fluo-3若以游离
配体形式存在时几乎是非荧光性的，但是当它与细胞内钙离子结合后可以产生较强的荧光，
最大激发波长为506nm，最大发射波长为526nm。实际检测时推荐使用的激发波长为
488nm左右，发射波长为525～530nm。可以使用激光共聚焦显微镜或流式细胞仪检测细
胞内钙离子浓度的变化。
4.操作说明(for Human T cells)
(1)试剂2mM的Fluo-3,AM/DMSO(将1mg Fluo-3,AM溶于442μL DMSO)；Pluronic
F127；Hanks?balanced salt solution(HBSS)；HEPES buffer saline(10mM HEPES，1mM
Na2HPO4，137mM NaCl，5mM KCl，1mM CaCl2，0.5mM MgCl₂，5mM glucose，0.1% BSA，pH7.4)
(2)操作
①.向Fluo-3,AM/DMSO溶液中加入16.5mg Pluronic F127，Pluronic F127可以防止Fluo-3,AM在HBSS中聚合并能帮助其进入细胞。
②.用HBSS稀释Fluo-3,AM溶液，制备4μM的Fluo-3,AM工作液。
③.将Fluo-3,AM工作液加入细胞，在37℃培养20分钟。
④.加入5倍体积的含有1%胎牛血清的HBSS，再继续培养40分钟。
⑤.用HEPES buffer saline洗涤细胞3次，然后用HEPES buffer saline使细胞重悬浮，制成1×10⁵ cells/mL的溶液。
⑥.37℃下培养10分钟，然后用该细胞进行荧光钙离子检测。激发波长506nm，发射波长
526nm。
标记的条件因细胞种类而异，在每次实验前，请先确定最佳条件。以上方法仅供参考。
储存条件：-20℃干燥避光保存，有效期一年。
相关搜索：Fluo 3-AM(钙荧光探针)，121714-22-5